Erotic •

Tå transen nav

2021-06-12T03:37:56
Add Comment
transen nav tå

transen nav tå

transen nav tå

transen nav tå

transen nav tå

transen nav tå

transen nav tå

transen nav tå

transen nav tå

transen nav tå

kvinnor stora naturliga bröst
transen nav tå

transen nav tå

transen nav tå

transen nav tå

transen nav tå

transen nav tå

transen nav tå

transen nav tå

transen nav tå

transen nav tå

transen nav tå

transen nav tå

transen nav tå

transen nav tå

transen nav tå

Detta protokoll presenterar en robust, reproducerbara modell av vascularized komposit allotransplant VCA inriktad mot samtidig studie av immunologi och funktionella återvinning. Tiden investerat i noggrann teknik i en rätt mitten av låret hind lem orthotopic transplantation med hand sydda vaskulär anastomoss och neurala coaptation ger förmåga att studera funktionella återhämtning. Lem transplantation i synnerhet och vascularized sammansatta allotransplant VCA i allmänhet har breda terapeutiska löfte som har varit stymied av nuvarande begränsningar i immunsuppression och funktionella neuromotor återvinning.

Många djurmodeller har utvecklats för att studera unika funktioner i VCA, men här presenterar vi en robust reproducerbar modell av orthotopic hind limb transplantation i råttor som syftar till att samtidigt undersöka båda aspekterna av nuvarande VCA begränsning: immunosuppression strategier och funktionell neuromotor återhämtning. Kärnan i modellen vilar ett engagemang för noggranna, tidstestade mikrokirurgiska tekniker som handsydda vaskulära anastomoser och handsydda neurala coaptation av lårbensnerven och den sciatic nerven.

Detta tillvägagångssätt ger hållbara lem rekonstruktioner som möjliggör längre livslängd djur som kan rehabilitering, återupptagande av dagliga aktiviteter, och funktionella tester. Med kortvarig behandling av konventionella immunsuppressiva medel överlevde allotransplanted djur upp till 70 dagar efter transplantation, och isotransplanted djur ger långlivade kontroller utöver dagar post-operatively.

Bevis på neurologiska funktionella återhämtning är närvarande med 30 dagar post operativt. Denna modell ger inte bara en användbar plattform för att förhöra immunologiska frågor som är unika för VCA och nervregenerering, men möjliggör också in vivo-testning av nya terapeutiska strategier som är särskilt skräddarsydda för VCA.

Lem transplantation under den bredare kategorin vascularized-komposit allotransplant VCA eller sammansatt vävnad allotransplant CTA har ännu inte uppfyllt sitt terapeutiska löfte.

Sedan den första framgångsrika mänskliga hand transplantationer i Lyon, Frankrike och Louisville, Kentucky och , över övre änden transplantationer har utförts över hela världen i noggrant utvalda patienter 1. Bredare tillämplighet har stymied av betydande immunsuppression och begränsad funktionella neuromotor återvinning. Å andra sidan sker funktionell återhämtning efter handtransplantation; menar Funktionshinder av Arm Shoulder och Hand DASH poäng förbättras från 71 till 43, men att nivån på funktionen kan fortfarande kvalificera sig som ett funktionshinder 2.

Med tanke på nonlife spara karaktär lem transplantation, måste nuvarande tekniker förfinas i djurmodeller för att ta nästa steg i VCA. Sedan den första råtta modell av lem transplantation i 3 , många innovativa djurmodeller har utvecklats för att föra området VCA 4 , införlivar vaskulär manschettskyddad anastomoser för att minimera operativ tid 5 , 6 , heterotopic osteomyocutaneous transplantationer för att minimera physiologic förolämpning till mottagaren djuret 7 , 8 , 9 , 10 , 11 , och nya immunologiska metoder 7 , 12 , 13 , Subscription Required.

Please recommend JoVE to your librarian. De specifika procedurerna utfördes enligt protokollet IS Lewis är en inavlad stam, medan ACI råttor representerar en ut-uppfödda vild-typ, därför denna kombination valdes för att modellera sämre fall avslag svar. Både han- och honråttor var berättigade mottagare från 8 till 16 veckor gamla, som vägde mellan och gram vid tidpunkten för operationen.

Överlevnad och återhämtning beror på noggrann kirurgisk teknik. Uppmärksamhet på de vaskulära anastomoserna och de neurala anastomoserna, samt benkoapteringen enligt ovan är avgörande för att maximera framgången för denna modell. Operativ design och representativa anastomotiska resultat visas i figur 1. Den totala dödligheten var beroende av immunsuppressionsstrategi, där majoriteten av de isotransplanterade djuren uppnådde studieslutpunkten på postoperativa dagar enligt figur 2.

Väl ut ur det akuta postoperativa fönstret kunde behandlade allotransplanterade djur uppleva överlevnad upp till 58 postoperativa dagar. Isografted råtta bodde idefinitely över jaga av studien, medan allograft transplanterade tjaller hade variabeln mortalitet från rapamycin och FK Ut ur behandlingarna FK främjade den längsta livskraften dag 57 , medan rapamycin var näst bäst dag 20 över den obehandlade kontrollen dag Sensorisk och motorisk återhämtning kan visas i figur 3.

Djur visade sig ha återhämtat sensorisk nerv funktion av den transplanterade tassen med Hargreaves apparaten vid dag Djur uppvisade betydande återhämtning med fyra veckor efter operationen Aii. Djur visade markanta förbättringar i motorisk funktion av den transplanterade extremiteten med hjälp av en gånganalys löpband och integrerad programvara analysplattform.

Bild 1: Operativ design avbildas i tecknad format. A Råttan visas med B höger bakben tvärsnitt föreställande i femorala bunt nerv, artär, och ven ii ischiasnerven, och iii benet.

C Representativa mikrografer från driftmikroskopet givaren vänster och mottagare höger togs av i ischiasnerven anastomos ii den femorala nervartären, och åderanastomoser visas uppifrån och ned , och iii gauge nål intramedullär stav-lårbensskoth coaptation. Observera att givarstrukturerna visas till vänster i varje foto. Observera också lårbenet visas före full coaptation när båda benen är emot och nålen är dold inom.

Vänligen klicka här för att visa en större version av denna figur. Figur 2: Procent överlevnad av djur som presenteras dagar efter operationen POD. Grupper som visas inkluderar isograft, allografts utan behandling, rapamycin, och FK immunsuppressiva läkemedel. Figur 3: Sensorisk nerv återhämtning visas i A Hargreaves testa transplanterade djur vardera vid sex postoperativa tidpunkter och i B fortfarande skott av löpband testning med DigiGait. Respektive färgkodade bilder av tassar finns också i 0, ms-ramar.

Digigate modeller iii visas också. Lem transplantation, under den bredare kategorin vascularized komponent allotransplantation VCA , har allmänt tillämpliga terapeutiska löfte ännu ouppfyllda. De viktigaste vägspärrarna ligger i olösta immunologiska frågor som är unika för VCA och neuromotoriska återhämtningstekniker som används för närvarande.

Utveckling av nya tekniker kommer att bero på djur modellering som är flexibel, robust och reproducerbar. Många djurmodeller har fastställts i VCA, var och en med specifika fördelar 4. Icke-mänskliga primatmodeller erbjuder attraktiv översättningsförmåga till mänskliga patienter, men har hämmats av kostnadsbekymren och toxiska nivåer av immunosuppression krävs 4.

Hund-modeller har setts som fördelaktigt för specifika likheter med muskulös struktur som människor samt en mer erfaren immunförsvar 19 , Porcine modeller erbjuder fördelarna med en stor djurmodell där immunsystemet är allt väl studerat 21 , Mus modellsystem presentera de mest avancerade tekniker för att studera immunologi, men trots viktiga framsteg i manschetten vaschetten kärl mikrokirurgiska anastomos 23 , mus lem transplantation förblir tekniskt utmanande och har vissa begränsningar i funktionella återhämtning bedömning 5 , 24 , 25 , Råtta modeller i VCA har utnyttjats sedan 3 , ger en mogen plattform för att undersöka både immunologiska och neuromotoriska hypoteser 6 , 9 , 13 , 14 , 17 , 27 , 28 , Modellen kombinerar här fördelarna med hindlimb orthotopic tillvägagångssätt, sutur anastomos, nerv re-approximation, och potential för gånganalys.

Hindlimb orthotopic i motsats till forelimb transplantation är mindre av en belastning på råttan under återhämtningsprocessen och möjliggör fortsatt normala grooming och utfodring beteenden post operativt. Suture anastomos även om mödosamt kan potentiellt erbjuda mindre tekniska confounding för långsiktiga studier.

Nerv re-approximation möjliggör framtida undersökning 17 , 18 och gånganalys. Detta protokoll bygger på noggranna, tidstestade mikrokirurgiska tekniker välbeskrivna någon annanstans 29 , kräver ständig uppmärksamhet för att undvika de omedelbara fallgropar bedövningsmedel överdos, anastomotic misslyckande, anastomotic trombos, och överdriven kirurgisk blodförlust.

Även om flera mikrokirurger kan förbättra arbetsflödet, har vi beskrivit en metod med vilken en enda drifts microsurgeon kan uppnå tillräcklig experimentell output. Autotomy eller självstympning har varit ett fenomen som noterats i flera mikrokirurgiska modeller, och det har varit en hypotes att omvänt korrelera med nervläkning 30 , Autotomy var övergripande kontrolleras i denna modell, eventuellt relaterade noggranna neurala anastomotic teknik.

Autotomi minskade också längre in i inlärningskurvan. Bitter Safe Mist var ett värdefullt komplement till att kontrollera detta fenomen. Gånganalys hos råttor har studerats för flera modeller av skada 32 , 33 , 34 , mest relevant för sciatic nervskada 35 , Råttor även när inte lem transplantation mottagare är kända för att vara heterogena ämnen för gånganalys, och utredare fortfarande debatt vilka analysparametrar beskriva återhämtning I denna modell har vi beskrivit flera metoder för att få de bästa uppgifterna från transplanterade mottagare som är villiga och kapabla att gå.

Preselection av adekvata vandrare var inte förutsägande av postoperativt samarbete. Även om djur kan röra sig om sitt boende så snart som flera timmar efter operationen, de är inte redo för löpband ambulation förrän minst fyra till sex veckor efter operationen. Ett protokoll förmåga att mäta nerv återhämtning i VCA är beroende av sin strategi för rehabilitering.

Detta protokoll främjar uttryckligen transplantation mottagare interagerar med andra råttor som incitament för att fungera. Denna strategi är medveten om vikten av modellering rehabilitering, men är enkel, ekonomisk, och är till stor del standard.

Framtida strategier kan omfatta mer aktiv rehabilitering såsom löpband utbildning. De immunologiska tekniker som gäller för denna modell är utanför ramen för denna diskussion, men i synnerhet, jämföra isotransplanta kontra allotransplanted djur ger en användbar kontroll för att skilja allograft immunologiska fenomen och avstötning från den ischemiska reperfusion skada, inflammation, revascularization och post-surgical infektion processer inneboende i transplantationen kirurgi själv.

Isotransplants ger en liknande kontroll för nervfunktionsstudier av samma anledning. Med hjälp av denna plattform, utredare kan kunna främja både VCA immunologi och neuromotor återhämtning. Zheng, F. To learn more about our GDPR policies click here. If you want more info regarding data storage, please contact gdpr jove. Thank you for your interest in JoVE. We will get back to you as soon as we can, so please stay tuned. If you need immediate assistance, please email us at support jove.

Your access has now expired. Provide feedback to your librarian. If you have any questions, please do not hesitate to reach out to our customer success team. Login processing JoVE Journal Medicine. Log in or Start trial to access full content. Placera råttan supine med spridda lemmar tejpade ut på sidorna på en operationsbräda med en värmedyna under.

Med hjälp av en lämplig mikrokirurgiska mikroskop, mikroskopiska instrument, och med enkel tillgång till bipolär och monopolär elektrocautery, börja dissekering.

Börja i inguinal veck medialt på ungefär samma nivå som inguinal ligament och förlänga dorsala-lateralt att slutföra det omkretsande snittet. Använd en tråd upprullningsdon eller rullade gasväv för att hjälpa exponera fältet. Observera att råttans inguinal anatomi liknar människor; från lateral till mediala ligga nerven, artär, och ven.

Dissekera ut lårbensnerven, dela den skarpt vid inguinal ligament, proximala till bifurkation om möjligt. Dra tillbaka den delade nerven underlägset, hålla den säkert ur vägen, täckt under fuktig gasväv. Vrida uppmärksamheten till lårbensartären och venen, använd 4 cm silkeband för att atraumatically dra tillbaka kärlen istället för att hantera dem direkt. Ligate alla grenar av lårbenskärlen som de uppstår med sidenband; dela grenarna mellan banden.

För mycket små grenar får bipolär cautery användas i stället för slipsar. OBS: Arteriella och venösa grenar som kräver indelning omfattar den ytliga cirkumflex iliaca och de muskulösa kärlen. Den ytliga cirkumflex iliaca är oftast största och verkar dyka djupt som skulle profunda femorala hos människor, men profunda är frånvarande i råttan Mer distala grenar av lårbenskärlen som den högsta genicular och den saphenous grenen kräver vanligtvis inte uppdelning. Systemiskt injicera internationella enheter heparin genom penisvenen i en hanråttrånare.

You may also like

7 Comment

  • Viss kraft är nödvändig, men inte ream antingen ben så långt som att bryta cortex. Hem Sök upphandlingar. Skräddarsydd bevakningsprofil. Artären kräver i genomsnitt sex suturer. Allt samlat i en komplett tjänst. Digigate modeller iii visas också. Acklimatisera djur till testrummet i en timme före testning, och möjliggöra en minut av pre-test petting till lugn ångest.
  • Efter behov, ta bort nålen och trimma den till en lämplig längd så att båda benen passar smidigt över nålen utan nål som visar mellan benet. Dela ventrala och ryggmuskulaturen i låret på mitten av låret nivå med minutiös hemostas, indragning av lem medialt vid behov. Please recommend JoVE to your librarian. Liknar artären, anastomose givaren och mottagaren lårbensvener i till mode. Transport och behandling av matavfall. Linköpings kommun Upphandlingen omfattar transporter av färdiglagad mat, vilket innebär transport av transportvagnar innehållande färdiglagad mat och i förekommande fal

Leave a Comment

Privacy Settings
We use cookies to enhance your experience while using our website. If you are using our Services via a browser you can restrict, block or remove cookies through your web browser settings. We also use content and scripts from third parties that may use tracking technologies. You can selectively provide your consent below to allow such third party embeds. For complete information about the cookies we use, data we collect and how we process them, please check our Privacy Policy
Youtube
Consent to display content from Youtube
Vimeo
Consent to display content from Vimeo
Google Maps
Consent to display content from Google
Save